بنزوناز نوکلئاز (کد E1014) Benzonase® Nuclease

ویژگی‌های آنزیم Benzonase®:

• نوع آنزیم: اندونوکلئاز از خانواده Serratia marcescens

• عملکرد: تجزیه‌ی DNA و RNA به قطعات کوتاه الیگونوکلئوتیدی

• شرایط بهینه: pH حدود ۷٫۵–۹ و در حضور Mg²⁺

• غیرفعال‌سازی: با EDTA (که یون‌های منیزیم را شلات می‌کند) یا حرارت‌دهی (گرمادهی)

معرفی بنزوناز نوکلئاز (Benzonase® Nuclease)

بنزوناز نوکلئاز، یک آنزیم نوترکیب با منشاء Serratia marcescens و کد محصول E1014، یکی از مؤثرترین آنزیم‌ها برای تخریب کامل اسیدهای نوکلئیک (DNA و RNA) به الیگونوکلئوتیدهای محلول است. این ماده در فرم محلول گلیسیرینی عرضه می‌شود و با غلظتی ≥۲۵۰ واحد در میکرولیتر، عملکردی بسیار قوی و دقیق در حذف نوکلئیک اسیدها از نمونه‌های پروتئینی دارد.

کاربردهای آنزیم Benzonase® Nuclease در زیست‌فناوری و تحقیقات سلولی

آنزیم Benzonase® Nuclease یک نوکلئاز با عملکرد بالا و غیرتخصصی است که توانایی تجزیه کامل اسیدهای نوکلئیک (DNA و RNA، تک‌رشته‌ای یا دو‌رشته‌ای) به قطعات الیگونوکلئوتیدی بسیار کوچک (۲ تا ۵ باز) را دارد. این ویژگی منحصر به فرد باعث شده تا بنزوناز به‌طور گسترده در طیف وسیعی از کاربردهای زیست‌مولکولی، زیست‌فناوری، و پزشکی بازساختی مورد استفاده قرار گیرد. در ادامه، به مهم‌ترین موارد استفاده از این آنزیم اشاره می‌شود:

1. افزایش راندمان استخراج پروتئین‌های هسته‌ای
   در فرآیند استخراج پروتئین‌ها از هسته سلول، حضور DNA و RNA می‌تواند منجر به افزایش ویسکوزیته و به دام افتادن پروتئین‌ها شود. استفاده از بنزوناز در ترکیب با بافر لیز سرد (مانند lysis buffer C)، باعث تخریب کامل اسیدهای نوکلئیک و آزادسازی مؤثر پروتئین‌های هسته‌ای برای آنالیزهای بعدی می‌شود.

2. تسهیل ایمونوپرسیپیتاسیون (immunoprecipitation) و تحلیل کمپلکس‌های پروتئینی
   در مراحل immunoprecipitation (IP)، بسیاری از کمپلکس‌های پروتئینی به DNA یا RNA متصل هستند. افزودن بنزوناز در این مرحله باعث تجزیه این اسیدهای نوکلئیک و افزایش خلوص کمپلکس‌های پروتئینی بازیابی‌شده می‌شود. این رویکرد به‌ویژه در مطالعات کروماتینی و پروتئین‌های متصل به DNA بسیار مؤثر است.

3. بهینه‌سازی جزء‌جزء کردن سلول‌ها برای مطالعات پروتئینی
   در تحلیل سلول‌های خاص مانند SHSY5Y (سلول‌های نوروبلاستوم انسانی)، ترکیب بنزوناز با بافرهایی نظیر RIPA امکان استخراج مؤثرتر پروتئین‌ها را فراهم کرده و حذف ناخالصی‌های نوکلئیک‌اسیدی را تضمین می‌کند.

4. کاربرد در مهندسی بافت و دسلولاریزاسیون
   در فرآیند دسلولاریزاسیون بافت‌ها، هدف حذف کامل سلول‌ها و باقی‌گذاشتن داربست خارج‌سلولی است. حضور باقی‌مانده‌های DNA و RNA می‌تواند موجب بروز پاسخ‌های ایمنی شود. استفاده از بنزوناز در شست‌وشوی نهایی، روشی مؤثر برای پاک‌سازی کامل اسیدهای نوکلئیک از ساختارهای زیستی نظیر ریشه آئورت است.

5. پاک‌سازی نمونه‌های پروتئینی از آلودگی‌های نوکلئیک‌اسیدی
   یکی از کاربردهای عمومی بنزوناز در آزمایشگاه‌های تحقیقاتی، حذف کامل DNA و RNA از نمونه‌های پروتئینی است. این فرآیند نه تنها باعث بهبود خلوص نمونه‌ها می‌شود، بلکه دقت و صحت نتایج حاصل از آنالیزهای بیوشیمیایی را نیز افزایش می‌دهد.

عملکرد بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی آنزیم Benzonase® Nuclease

آنزیم Benzonase® Nuclease یک نوکلئاز با عملکرد گسترده و کارایی بالا است که توانایی تجزیه کامل انواع DNA و RNA، چه به صورت بومی (native) و چه دناتوره‌شده (heat-denatured)، را دارد. این آنزیم، اسیدهای نوکلئیک را به قطعات بسیار کوتاه ۳ تا ۵ نوکلئوتیدی با انتهای ۵′-مونوفسفات تبدیل می‌کند. این ویژگی، آن را به ابزاری ایده‌آل برای حذف کامل اسیدهای نوکلئیک از نمونه‌های زیستی، به‌ویژه در خالص‌سازی پروتئین‌های نوترکیب و مطالعاتی که به خلوص بالای پروتئینی نیاز دارند، تبدیل کرده است.

یکی از مهم‌ترین اثرات استفاده از Benzonase® کاهش ویسکوزیته عصاره‌های سلولی است. حضور DNA و RNA در عصاره‌های پروتئینی منجر به افزایش ویسکوزیته و چسبندگی می‌شود که می‌تواند فرآیند استخراج، سانتریفیوژ و انتقال را مختل کند. همچنین، این آنزیم از تجمع سلولی (cell clumping) جلوگیری کرده و یکنواختی نمونه‌ها را بهبود می‌بخشد.

در تکنیک‌های تحلیلی مانند الکتروفورز دوبعدی ژل (۲D-PAGE)، حضور اسیدهای نوکلئیک متصل به پروتئین‌ها ممکن است موجب تداخل در تفکیک و شناسایی پروتئین‌ها شود. پیش‌درمان نمونه‌ها با آنزیم Benzonase® از طریق حذف این مولکول‌های متصل، سبب افزایش وضوح و کیفیت باندهای پروتئینی می‌شود. به همین دلیل، این آنزیم نقش مهمی در بهبود نتایج حاصل از روش‌های تحلیلی پیشرفته دارد.

از نظر شرایط کاری، Benzonase® در دامنه‌ی pH بهینه ۸.۰ تا ۹.۲ بیشترین فعالیت را از خود نشان می‌دهد و در حضور یون‌های فلزی دوظرفیتی مانند Mg²⁺ عملکرد بهینه‌ای دارد.

در سال‌های اخیر، کاربرد این آنزیم در مطالعات میکروبیوم نیز گسترش یافته است. در بسیاری از نمونه‌های زیستی مانند بزاق، پوست یا مدفوع، مقدار قابل توجهی DNA میزبان (Host DNA) وجود دارد که می‌تواند در آنالیز میکروبی اختلال ایجاد کند. بنزوناز با حذف DNA انسانی، باعث افزایش خلوص داده‌های میکروبی، کاهش نویز ژنتیکی و کاهش هزینه‌های توالی‌یابی می‌شود. به‌کارگیری این آنزیم در مراحل اولیه پردازش نمونه، یک گام مؤثر در بهینه‌سازی عملکرد روش‌های توالی‌یابی نسل جدید (NGS) و آنالیزهای متاژنومیکی است.

نگهداری و حمل

• شرایط نگهداری: در دمای −۲۰ °C، دور از نور و گرما نگهداری شود.
• شرایط حمل: در یخ مرطوب ارسال شود تا از فعالیت آنزیم محافظت شود.

لینک‌های مفید:

• 🔗 مشاهده محصول در سایت Sigma aldrich:

  sigmaaldrich-Benzonase® Nuclease-E1014

سوالات متداول (FAQ)

۱٫ آیا بنزوناز نوکلئاز در تخریب RNA نیز موثر است؟ بله، این آنزیم قادر است RNA را به صورت کامل تجزیه کند، حتی در فرم‌های حلقوی یا تک‌رشته‌ای.

۲٫ آیا این آنزیم در حضور EDTA فعال است؟ خیر، فعالیت آن وابسته به حضور یون‌های منیزیم (Mg2+) است و EDTA می‌تواند آن را مهار کند.

۳٫ آیا محصول برای مصارف انسانی یا دارویی تاییدیه دارد؟ خیر، فقط برای استفاده تحقیقاتی است و نباید در مصارف انسانی یا تشخیص بالینی استفاده شود.

نحوه سفارش بنزوناز نوکلئاز (کد E1014) Benzonase® Nuclease

برای دریافت مشاوره رایگان، اطلاعات بیشتر در مورد قیمت و موجودی، یا ثبت سفارش بنزوناز نوکلئاز (Benzonase® Nuclease E1014)، همین حالا با کارشناسان ما تماس بگیرید یا از طریق فرم آنلاین اقدام نمایید. پشتیبانی تخصصی ما در خدمت شماست تا بهترین انتخاب را برای پروژه‌های تحقیقاتی و صنعتی خود داشته باشید.

۰۲۱-۶۶۴۰۴۴۵۰

۰۹۱۰۳۸۰۵۲۵۸

[تماس با ما] | [فرم سفارش آنلاین]